12 resultados para ROS

em Repositório Institucional UNESP - Universidade Estadual Paulista "Julio de Mesquita Filho"


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Osteoclastogenesis may be regulated via activation of the RANK/RANKL (receptor activator of nuclear factor-kappa B/ receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand) system, which is mediated by osteoblasts. However, the bone loss mechanism induced by T3 (triiodothyronine) is still controversial. In this study, osteoblastic lineage rat cells (ROS 17/2.8) were treated with T3 (10(-8) M 10(-9) 10 M, and 10(-10) M), and RANKL mRNA (messenger RNA) expression was measured by semiquantitative RT-PCR. Our results show that T3 concentrations used did not significantly enhance RANKL expression compared to controls without hormone treatment. This data suggests that other mechanisms, unrelated to the RANK/RANKL system, might be to activate osteoclast differentiation in these cells.

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Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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Os mecanismos pelos quais o hiper e hipotireoidismo afetam o osso durante a menopausa são pouco conhecidos. O objetivo deste estudo foi verificar a ação do hormônio triiodotironina (T3), em diferentes concentrações associado ao estrógeno (E2) em concentração infra-fisiológica (condição de menopausa), sobre a proliferação de células de rato ROS 17/2.8, através de uma curva de crescimento para obtenção do tempo de dobramento (TD). As células ROS 17/2.8 são consideradas modelo de células osteoblásticas e foram cultivadas em meio HAM F-12, e submetidas ao tratamento hormonal com as combinações das concentrações fisiológica, infrafisiológica e suprafisiológica de T3 e infra-fisiológica de E2. Utilizamos como grupo controle aquele tratado com as concentrações fisiológicas dos dois hormônios. Para cada concentração hormonal foram realizadas 5 repetições, e as células contadas manualmente nos dias 1, 3, 5 e 7, após o início da adição hormonal. A análise estatística utilizada foi a técnica da análise de variância não paramétrica, complementada com teste de comparações múltiplas. Baseando-se nos resultados obtidos, pode-se concluir que o crescimento das células ROS 17/2.8 é afetado pelos tratamentos hormonais, em especial quando a concentração infrafisiológica de E2 está associada à concentração suprafisiológica de T3, aumentando o tempo de dobramento celular. Este efeito poderia tornar o metabolismo do osso mais lento, prejudicando a neoformação óssea em pacientes menopausadas e hipertireoidéas

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Objectives: This report highlights phytoconstituents present in Cissus quadrangularis (CQ) extract and examines biphasic (proliferative and anti-proliferative) effects of its extract on bone cell proliferation, differentiation, mineralization, ROS generation, cell cycle progression and Runx2 gene expression in primary rat osteoblasts. Materials and methods: Phytoconstituents were identified using gas chromatography-mass spectroscopy (GC-MS). Osteoblasts were exposed to different concentrations (10-100g/ml) of CQ extract and cell proliferation and cell differentiation were investigated at different periods of time. Subsequently, intracellular ROS intensity, apoptosis and matrix mineralization of osteoblasts were evaluated. We performed flow cytometry for DNA content and real-time PCR for Runx2 gene expression analysis.Results: CQ extract's approximately 40 bioactive compounds of fatty acids, hydrocarbons, vitamins and steroidal derivatives were identified. Osteoblasts exposed to varying concentrations of extract exhibited biphasic variation in cell proliferation and differentiation as a function of dose and time. Moreover, lower concentrations (10-50g/ml) of extract slightly reduced ROS intensity, although they enhanced matrix mineralization, DNA content in S phase of the cell cycle, and levels of Runx2 expression. However, higher concentrations (75-100g/ml) considerably induced the ROS intensity and nuclear condensation in osteoblasts, while it reduced mineralization level, proportion of cells in S phase and Runx2 level of the osteogenic gene.Conclusions: These findings suggest that CQ extract revealed concentration-dependent biphasic effects, which would contribute notably to future assessment of pre-clinical efficacy and safety studies.